Макет страницы
В соответствии с данным определением
О _ Ir — ^20,W
*20- d4-d '
где т|т - — вязкость растворителя при температуре Т\ т)2о, w — вязкость воды при 20 °С; d — плотность растворителя при температуре Т; d2o, w—плотность воды при 20 °С.
Коэффициентом седиментации служит Сведберг (С), причем 1 C=IO-13C Приводим значения коэффициентов седиментации s%, w некоторых биологических частиц (в С): трипсин 3, сывороточный альбумин 4, фибриноген 8, каталаза 10, рибосомы 70—80, вирус полиомиелита 100, вирус гриппа 600.
Техника центрифугирования растворов высокомолекулярных соединений предъявляет особые условия к роторам, способным выдерживать огромные нагрузки; к конструкциям ячеек, заполняемых растворами, и средствам контроля за концентрацией вещества на различных расстояниях от оси вращения.
В современных ультрацентрифугах обеспечивается вращение ротора до 75 000 об/мин, причем специальные устройства поддерживают аппаратуру с точностью до ±0,1°.
Сложные проблемы приходится решать при разработке оптимальных конструкций ячеек. Часто ячейка устроена так, чтобы полость, в которую заливают исследуемый раствор, имела форму сектора, расширяющегося по направлению от оси вращения. При такой форме устраняется оседание частиц на боковых стенках ячейки. К длине ячейки предъявляются взаимоисключающие требования. Если она будет слишком коротка, то быстрое накопление вещества на дне приведет к возникновению диффузионного потока, препятствующего оседанию частиц, а в длинной ячейке возникают гидростатические давления и увеличивается вероятность возникновения конвекционных токов в жидкости. Компромиссная длина ячейки близка к 12—15 мм.
В ультрацентрифуге за оседанием макромолекул в центробежном поле наблюдают с помощью специальных оптических устройств.
Существует два метода контроля раствора на разных расстояниях от оси вращения. В одном из них скорость седиментации оценивают по изменению со временем градиента показателя преломления. В другом методе, называемом абсорбционным, концентрацию определяют по оптической плотности растворов. Если изучаются растворы белков, то оптическую плотность определяют в ультрафиолетовой
J 55
